时间:2016-05-23来源:飞测生物点击量:
黄曲霉毒素严重污染以花生、稻米、植物油为代表的谷物、荚果、豆类、植物油等农产品,常发生在农产品生产、收获、晾晒、运输、储藏、加工、销售等各个环节,必须从全过程检测和监控黄曲霉毒素,从源头解决农产品质量安全问题。由于中国花生、玉米等农产品具有小规模生产方式以及鲜活农产品货架期短等特点,迫切需要检测成本低、测定快速、适于现场定量筛查的检测技术标准。现有黄曲霉毒素检测主要是ELISA等快速筛查技术和色谱/质谱的确证检测技术。本研究建立的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术与现有快速筛查技术相比具有能定量检测、假阳性少、重复性好、操作更简单等优点;与确证性检测技术相比,无需昂贵大型仪器,易于实现田间即时检测,适用于中国农业检测实际情况。
本研究实现了将Eu3+包覆于硅胶机制,形成硅胶荧光微粒作为时间分辨荧光标记物,显著增强了时间分辨荧光强度,提高了荧光稳定性,并且具有良好的水溶性和生物兼容性。黄曲霉毒素高特异性抗体是实现高灵敏时间分辨荧光检测的核心材料。本研究使用自主研发的高特异性抗体,显著提高检测灵敏度。与已有的胶体金试纸条方法相比,该方法的灵敏度提高了1—2个数量级。高灵敏度的时间分辨荧光主要来源于以下3个方面:(1)时间分辨荧光具有较大Stock位移,减少了由激发光引起的特异杂散光对检测的干扰,提高荧光检测稳定性;(2)时间分辨荧光寿命长,消除了环境中荧光物质对待测物的干扰;(3)时间分辨荧光激发波长较宽,发射光谱范围较窄,降低了本底荧光强度,提高了分辨率。
(本段引用自: 张兆威, 李培武, 张奇, 丁小霞. 农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究. 中国农业科学, 2014, 47(18): 3668-3674[ZHANG Zhao-wei, LI Pei-wu, ZHANG Qi, DING Xiao-xia. Study on Time-Resolved Fluorescence Immunochromatography for Afaltoxin Determination in Agricultural Product. Scientia Acricultura Sinica, 2014, 47(18): 3668-3674] )
上海飞测生物联合农业部生物毒素检测重点实验室,推出了全球首款黄曲霉毒素B1荧光定量快速试纸条(荧光定量免疫层析法),荣获2015年度国家技术发明二等奖,打破了国外产品在这一领域的技术优势,性能优于国外相关产品。本产品可在10min内快速定量检测各种粮食谷物、植物油、饲料原料及部分饲料中黄曲霉毒素B1的含量,样品前处理简单,操作简便,采用荧光读数仪读数,结果准确可靠,适用于各类粮食、粮油、饲料加工企业及检测机构。
一、黄曲霉毒素B1荧光定量试纸条技术性能
1、 灵敏度:0.5ng/mL;
2、 定量线性范围:1.0ng/mL - 50.0 ng/mL;
3、样品前处理时间:8min;
4、检测时间:10min;
5、准确度:添加回收率为80%-125%;
6、 特异性:在1000 ng/mL浓度水平下与其它真菌毒素无交叉反应;
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