上海飞测生物为您提供食品安全、动物疾病、微生物及毒素、环境污染监测等领域的抗原抗体,同时我们拥有专业的抗原抗体制备技术团队,为您提供一站式抗原抗体制备服务。我们提供的抗体服务包括:多克隆抗体制备、单克隆体制备、抗体纯化等。欢迎来电咨询!
一、多克隆抗体制备服务流程
动物免疫(宿主动物可提供兔、羊、鸡、小鼠) |
||
设计实验方案 |
客户有特殊需求,需提供详细的实验要求 |
2-3工作日 |
免疫实验动物 |
分为三到四次免疫,Elisa检测即时效价 |
6-12周 |
微测Elisa检测 |
以免疫原为抗原样品,保证Elisa检测效价1:10000以上 |
1周 |
客户检测 |
自行设计检测方案 |
1周 |
合格,抗体及技术服务报告交付客户;不合格,服务停止; |
二、单克隆抗体制备服务流程
第一阶段:免疫小鼠 |
||
设计实验方案 |
客户有特殊需求,需提供详细的实验要求 |
2工作日 |
免疫实验动物 |
5只6-8周龄BALB/C小鼠,Elisa检测即时效价 |
7-8周 |
Elisa检测 |
以免疫原为抗原样品,保证Elisa检测效价1:10000以上 |
1周 |
第二阶段:单克隆杂交瘤细胞株的建立 |
||
细胞融合 |
取小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选阳性克隆 |
2-3周 |
克隆扩增和初选 |
扩增并低温保存一个成功融合的产物 |
1周 |
亚克隆 |
有限稀释法亚克隆至形成稳定的单克隆融合细胞株 |
4-6周 |
抗体鉴定(依据订单要求) |
测定上清抗体亚型、特异性、抗体中和反应性及抗体配对参数 |
1-4周 |
腹水制备/转瓶培养 |
依据客户要求,提供不同种类服务 |
4-6周 |
抗体纯化 |
利用Protein A亲和纯化 |
1周 |
第三阶段:单克隆杂交瘤细胞株的验收 |
||
提供的杂交瘤培养物的腹水(或上清液)与顾客方提供的抗原样品有特异性结合,同时抗体特异性只针对客户方提供的抗原样品做出保证 |
||
第四阶段:单克隆杂交瘤细胞株的交付 |
||
2-3株杂交瘤细胞株和少量腹水(或上清液),需要纯化的订单会依据订单要求提供纯化后抗体,并给出相应的鉴定报告(包括单抗的亚型) |
三、抗体纯化服务流程
抗原亲和纯化 |
使用抗原偶联Sepharose 4B制备抗原亲和纯化层析柱,仅捕获针对抗原的特异性抗体,纯化得到的抗体产物纯度高到90%以上,特异性强、灵敏度高,能明显减低背景信噪干扰,是抗体纯化中最佳的实验方法之一 |
1-2周 |
Protein A/G纯化 |
特异性的捕获样品中的IgG,性价比较高,特别适用于大规模样品的纯化 |
1-2周 |
饱和硫酸铵沉淀法纯化 |
分离所有的免疫球蛋白,得率最高,但特异性和灵敏度偏低,仅适用于定性分析 |
1周 |